香港自1841年開埠後脫離澳門教區，發展成為「宗座監牧區」，由若瑟神父（Theodore Joset，1804-1842）出任首任監牧。兩年後，首座香港天主教聖堂在中環威靈頓街落成，後因火災被毀，於1860年在原址重建聖堂。因聖堂奉無原罪聖母為主保，稱為聖母無原罪堂。香港於1874年升格為「宗座代牧區」，由高主教（Giovanni Timoleone Raimondi， 1827-1894）出任首任代牧。主教堂的新建築於1888年12月7日落成，位於現址香港半山堅道16號，見證了香港百多年的歷史變遷。

第二次世界大戰結束後，香港宗座代牧區晉升為「香港教區」，恩理覺主教（Enrico Pascal Valtorta，1883-1951）被委任為教區首任主教，總堂則改稱為聖母無原罪主教座堂。1969年，因梵帝崗第二次大公會議的禮儀革新要求，因而為座堂進行大裝修。直到1988年建堂一百周年慶典時，再次進行大規模的改善工程，並於2003年榮獲聯合國教科文組織亞太地區頒發的文化遺產保護獎榮譽獎。香港天主教聖母無原罪主教座堂採用英國歌德式建築設計，教堂的形狀像拉丁的十字架，座堂內的彩繪玻璃窗也別具特色。